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AbstractP 187 Toxizitätsanalysen von Bevacizumab (Avastin) auf humane korneale Zellen Yoeruek E., Spitzer M. S., Tatar O., Aisenbrey S., Bartz-Schmidt K. U., Szurman P.
Universitäts-Augenklinik Tübingen Ziel: Untersuchung toxischer Eigenschaften von Bevacizumab (Avastin) auf humane korneale Zellen.
Methode: Zellkulturen von kornealen Epithelzellen (KE), stromalen Fibroblasten (SF) und kornealen Endothelzellen (KEZ) wurden von menschlichen Donoren (Korneaskleralring) gezüchtet und verschiedenen Avastinkonzentrationen ausgesetzt (0.082.5 mg/ml). Die Zellvitalität wurde mittels 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) Test an den Tagen 1 und 4 nach Exposition analysiert. Für toxische Analysen wurde ein konfluenter Zellstatus im Serum entzogenem Mileu nach 24 h verwendet. Die Expression von vaskulärem endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF), deren Rezeptoren VEGF-Rezeptoren (VEGFR1 and VEGFR2), Keratansulfat (KS) und Zytokeratin-3 (AE5) wurde mittels Immunhistochemie untersucht. Für weitere Toxizitätsanalysen wurde das Life Death Kit verwendet. Die Zellmorphologie wurde mittels Phasenkontrastmikroskopie über einen Zeitraum von 7 Tagen beobachtet und nach Indikatoren für eine Zellschädigung gefahndet.
Ergebnisse: Wir konnten keine toxischen Effekte von Bevacizumab auf korneale Zellen beobachten, auch in Avastinkonzentration von 2,5 mg/ml, die 10 fach höher sind, als in der routinemäßigen vitreoretinalen Applikation. Auch bei den phasenmikroskopischen Analysen stellten wir keinen Unterschied zwischen den Avastin exponierten Zellen im Vergleich zu den Zellen ohne Avastinexposition. KE, SF und KEZ Zellen zeigten eine Expression von VEGF und deren Rezeptoren. KE und KEZ waren immunopositiv für AE5, SF waren immunopositiv für KS.
Schlussfolgerungen: Bevacizumab ist nicht toxisch gegenüber menschlichen kornealen Zellen, auchin Dosen, die höher als das 10 fache der routinemäßigen vitreoretinalen Applikation sind. KE, SF und KEZ Zellen zeigten eine Expression von VEGF und deren Rezeptoren. KE und KEZ waren immunopositiv für AE5, SF waren immunopsitiv für KS.
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