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AbstractFR.23.09 Charakterisierung und funktionelle in-vivo-Untersuchung des Konjunktiva-assoziierten lymphatischen Gewebes (CALT) mittels 2-Photonenmikroskopie Steven P.
Institut für Anatomie, Universität zu Lübeck und Klinik für Augenheilkunde, UK-SH, Campus Lübeck, Lübeck Ziel: In der Pathogenese des Trockenen Auges wird unter anderem ein Zusammenhang mit dem Konjunktiva-assoziierten lymphatischen Gewebe (CALT) des Auges diskutiert. Obwohl CALT morphologisch gut untersucht ist, sind funktionelle Studien jedoch bislang nur unzureichend durchgeführt worden. Aussagen zum Zusammenhang zwischen CALT und Trockenem Auge basieren daher hauptsächlich auf Studien mit Mukosa-assoziiertem lymphatischem Gewebe (MALT) anderer Schleimhäute wie zum Beispiel der des Darms. Innerhalb des vorgestellten Projekts wird gezeigt, dass anhand eines etablierten Maus Tiermodells und mittels 2-Photonenmikroskopie CALT erstmals funktionell in-vivo untersucht werden kann.
Methode: Die Konjunktiva weiblicher Balb/c Mäuse wird topisch mit Chlamydia trachomatis C oder Ovalbumin/Choleratoxin B stimuliert. Das induzierte CALT wird mittels 2-Photonenmikroskopie in-vivo minimal-invasiv untersucht.
Ergebnisse: Erste Vorarbeiten zeigen dass die Applikation des jeweiligen Pathogens zu einer zuverlässigen Ausbildung von CALT führt. Erste Untersuchungen mit der 2-Photonenmikroskopei, einer neuen Bildgebungstechnik, zeigen, dass CALT in Echtzeit minimal-invasiv dargestellt werden kann. Hochauflösende Aufnahmen der Autofluoreszenz bis in eine Gewebetiefe von bis zu 90 um zeigen alle strukturellen Anteile von CALT (Lymphoepithel, Follikel, Blut- und Lymphgefäße) ohne Verwendung artifizieller Farbstoffe und ohne Notwendigkeit einer Fixierung.
Schlussfolgerungen: Mittels des etablierten Tiermodells und der 2-Photonenmikroskopie sind erstmalig funktionelle in-vivo-Untersuchungen von CALT möglich. Aufgrund der Echtzeituntersuchungen können immunologische Mechanismen in der Konjunktiva dargestellt werden und zukünftig Aussagen zum Zusammenhang mit der Pathogenese des Trockenen Auges gestellt werden.
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